| 小鹅瘟的诊断防治概述 |
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作者:未知
时间:2008-01-28
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随着畜牧产业结构的调整和对肉类绿色食品的需求,养鹅业的发展日渐兴盛。小鹅瘟是养鹅业危害较大的传染病,本文对小鹅瘟进行了系统而全面的阐述,希望能使一些养殖户和专业人士有所收获。 1 病原与流行病学 小鹅瘟是雏鹅感染小鹅瘟病毒(Gosling Plapue Virus GPV)所引起的一种急性败血性传染病。1956年方定一在扬州发现首例小鹅瘟。1966年以后,欧亚两洲十多个国家相继报道了雏鹅的类似疾病。至1974年以后他们对病毒的特性进行了全面的研究,并确定该病毒属于细小病毒科,同时证明了十多个国家所分离的病毒具有相似的血清型。 小鹅瘟病毒属于细小病毒科,细小病毒属,鹅细小病毒,与其它细小病毒之间没有抗原关系。病毒粒子呈六面体,直径为20~22nm,无囊膜,45面体对称,其芯髓为单股脱氧核糖核酸。本病毒与细小病毒属中其它病毒成员之间有一个显著的不同点,就是不能凝集鸡、鹅,鸭、兔、豚鼠、小鼠、绵羊、山羊、猪、奶牛和人类的O型红细胞。据Malkinson和peleg(1974)报道,本病毒能凝集黄牛精子,并可用抗血清作凝集抑制试验。世界各地所流行的该疾病,在毒株抗原性方面都十分相似。病毒含有三种结构多肽,分子量分别为85000(VP1),61000(VP2)和57500(VP3,其中VP3为主要结构多肽。 小鹅瘟病毒对鹅有特异性致病作用,而对鸭、鸡、鸽、鹌鹑等禽类及哺乳动物无致病性。病毒存在于患病雏鹅的肝、脾、肾、胰、脑、血液、肠道、心肌等各脏器及组织中。病毒初次分离时,将病料制成悬液接种于12~14天易感鹅胚的绒尿腔或绒尿膜,鹅胚一般在接种后5~7天死亡;鹅胚分离毒连续通过多代后,对胚胎致死时间可以稳定在3~5天。初次分离的病毒株不能在生长旺盛的鹅胚和番鸭胚成纤维细胞中复制,而鹅胚适应毒株能在生长旺盛的鹅胚和番鸭胚成纤维细胞中复制,并逐渐引起有规律性细胞病变。初次分离的病毒株和鹅胚适应毒株均不能在鸡胚内复制。 GPV在自然感染情况下,除发生于雏鹅和雏番鸭、莫斯科鸭外,其它禽类和哺乳动物均不感染发病。本病主要侵害4~20日龄的雏鹅,20日龄以内的小鹅免疫功能不全,尤其以7~10日龄时发病率和死亡率最高,发病日龄越小,死亡率越高;不同地区、不同日龄、不同免疫状况的鹅群,其发病率与死亡率各不一致。5日龄以内的雏鹅感染发病,其死亡率高达95%以上;6~10日龄雏鹅为90%左右,11~15日龄雏鹅为50%~70%,16~20日雏鹅为20%~50%,21~30日龄雏鹅为10%~30%,30日龄以上的雏鹅为10%左右。成年鹅感染小鹅瘟病毒后,不显症状而成为带毒者,可长达15天的带毒与排毒,小鹅瘟病毒可经患病雏鹅的排泄物和分泌物污染饲料、饮水、用具、场地、环境等,通过消化道感染,并迅速波及全群;带毒鹅群所产的蛋常带有病毒,常造成雏鹅在出壳后3~5天内大批发病、死亡。成年鹅感染后,可能经卵将疾病传染下一代。小鹅瘟的流行有一定周期性。在大流行以后,当年余下的鹅群都能产生主动免疫,使次年的雏鹅具有天然被动免疫力。因此,本病不会在同一地区连续两年发生大流行。 2 症状与病变 本病潜伏期一般为3~5天,2~3周龄小鹅的潜伏期可能在5~10天之间。根据病程长短可分为最急性、急性和亚急性等病型。 最急性型:3~5日龄雏鹅发病常为最急性型。一般不出现明显症状即倒地乱划死亡。最急性型病例由于死亡很快,除肠道发生急性卡他性炎症外,其它器官一般无明显病变。 急性型,5~15日龄内大多数病例常为急性型。精神萎顿,行动迟缓,虽随群采食但随啄随甩,饮水多,拉出灰白或淡黄绿色稀粪并混有气泡或纤维碎片,鼻孔周围粘有污秽,喙端色泽变暗。病程半天至两天。15日龄左右死亡的雏鹅病变最典型,显示全身败血症变化;肝脏瘀血肿大,质脆易碎,肝细胞颗粒变性;肾略肿大,呈暗红色,肾小球充血肿胀,内皮增生;胰腺肿胀呈淡红色,偶见灰白色小结节;心脏发生急性心力衰竭变化,心肌晦暗无光泽呈现特征性苍白;尸体肛周粘附稀粪,泄殖腔扩张,口鼻流出稀薄液体,粘膜呈棕褐色;结膜干燥,全身脱水,皮下组织显著充血;脑膜血管充血出血,神经胶质细胞增生。本病的特征性病变是小肠(空肠和回肠部分)呈急性卡他、纤维素性坏死性肠炎。典型的变化是在小肠中下端整片肠粘膜坏死脱落,与凝固的纤维素性渗出物形成栓塞;肠内容物表面包裹被膜,堵塞肠腔。剖检时见回盲部肠段膨大,质地坚实,约2~5cm,状如香肠,淡灰或淡黄色的栓塞将肠管全部塞满。肠壁变薄,不形成溃疡。部分肠粘膜表面附着散在的纤维素性凝块而不形成条带或栓塞。此种特征性的栓塞已被认为是小鹅瘟具有的特征性的病变。 亚急性型:亚急性型多出现于流行末期,雏鹅消瘦拉稀,病程在3~7天,少数幸存者在一段时间内生长不良。 3 诊 断 3.1 小鹅瘟的诊断可通过流行病学结合症状、病变作出初步诊断。(1)Malkinson发现GPV能凝集黄牛的精子,并可用抗血清凝集抑制试验,但在实际应用中难以推广。(2)1~2周龄雏鹅大批发生肠炎症状,死亡率高,成年鹅与其它禽类不感染。(3)严重下痢,捧出灰白或黄绿色水样稀粪,有时发生神经症状。(4)肠道内有脱落假膜,在小肠末端发现特有的栓塞。同时,本病应与禽霍乱、雏鹅副伤寒相区别。禽霍乱亦能使雏鹅发生大批死亡,但不受日龄限制,死禽主要为败血变化,肝脏有白色小坏死灶;副伤寒死亡率比本病小,肠道不形成栓塞,作细菌分离即可区别。 3.2 实验室诊断 要确切诊断小鹅瘟则必须作病原体的分离、鉴定,选择适宜的实验诊断方法。 3.2.1 血清学诊断 3.2.1.1 琼脂扩散试验 琼脂扩散试验以8%NaCl溶液配成1%的琼脂,制成平板并打梅花孔,作双向扩散。中间孔加入已知GPV抗血清或单克隆抗体(MAb),周围孔加入待检抗原(病雏肝脾悬渤、已知GPV抗原、健康雏鹅正常肝脾悬液。琼脂扩散试验方法简便,适宜于基层应用。 3.2.1.2 中和试验病原分离:无菌采取病雏肝、脾、脑磨碎作悬液,加抗菌素后接种12~14日龄鹅胚,接种后3~6天死亡;取尿囊液作无菌检验,观察胚病变,胚体充血、出血、水肿,心肌变性呈瓷白色。将分离的病原与已知抗小鹅瘟血清或单克隆抗体(MAb)作鹅胚中和试验。 3.2.1.3 保护试验 用已知抗小鹅瘟血清注射易感雏鹅,然后用待检病毒攻击;或用被检血清注射易感雏鹅,然后用已知小鹅瘟强毒攻击。根据被保护的情况,确定被检病毒。 3.2.1.4 琼脂扩散抑制试验 琼扩抗原加入相应抗体,则抗原和抗体结合而抑制沉淀带的出现;如加入抗体过多,抗原和抗体结合后还有过剩抗体,又可与抗原相结合出现沉淀。此法可检测抗原成分,鉴定沉淀带性质以及抗原抗体结合的最适比例。 3.2.2 免疫荧光诊断法 以抗小鹅瘟MAb进行荧光标记,并对该荧光抗体作化学鉴定(F/P比值)、染色试验和特异性鉴定。采用直接法滴加2~4个单位的标记抗体于标本区,置湿盒于37℃,30min,再漂洗,干燥,镜检。小鹅瘟免疫荧光直接法检出率高、特异性强,但需配备荧光显微镜。 3.2.3 用抗GPV单抗lgG建立的反向间接血凝试验 用氯化铬致敏法将提纯抗GPV单抗,lgG致敏鹅或绵羊红细胞作反向间接血凝,对病鹅组织有较高的阳性检出率,且与其它病毒无交叉反应,灵敏且重复性好,有实用价值。 3.14 免疫酶斑点法 在硝酸纤维素膜上分点滴加5μl样品,以酶标MAb作直接ELISA。该方法简便快速,敏感准确,其最低检出病毒蛋白量为8.5mg/μl。阳性反应色斑易于观察,不需使用任何仪器,适用于大批量样品快速检测,便于在基层推广。 3.2.5 核酸探针技术从纯化的GPV中提取病毒核酸,在非变性条件下同非放射性标记物地高辛(digoxigenin)进行标记而制备探针。在特异性检测中,该探针仅与GPV核酸发生阳性反应,而不与正常雏鹅组织及其他病毒核酸抽提物反应。具有快速、准确、简便等优点。 3.2.6 电镜检测 常国权等(1996)建立了GPV的直接透射电镜检测。取病料组织或感染培养物做成电镜标本后染色检查,是病毒检测的一种快速而可靠的方法。常氏认为该方法检测迅速,1h内出结果,敏感性高。 4 预 防 小鹅瘟同一地区流行呈现一定周期性,大流行每2~4年一次,小流行每年都有。应通过控制传染源,切断传播途径,提高动物的抗病力入手。 4.1 加强引种管理 不从有病的地区引进种蛋或种鹅。非免疫的雏鹅群在21日龄内必须隔离饲养,严禁与非免疫种鹅、成年鹅接触以及到其他鹅群放过牧的场地进行放牧。 4.2 加强消毒措施 本病主要通过孵坊传播。因此,孵坊的一切用具、设备,每次使用前后都必须清洗消毒。收购来的种蛋最好用福尔马林熏蒸消毒。一经发现孵坊感染GPV,则应立即停止孵化。严禁从疫区购买种蛋、种鹅、雏鹅,尽量做到自繁自养,初出壳雏鹅不宜与种蛋或大鹅接触,控制和预防孵化场传播。鹅舍应经常打扫、定期消毒,加强雏鹅的饲养管理。 4.3 免疫监测基础上加强免疫 4.3.1 做好小鹅瘟免疫监测是制定防治措施的基础,是防治好本病的保证。种鹅免疫水平直接关系着雏鹅的保护率,在大的种鹅场如能很好的掌握免疫抗体的水平,在不同免疫水平情况下采取相应的防制措施是十分重要的;对大规模养鹅场和孵化厂应适时进行母源抗体监测,发现雏鹅母源抗体参差不齐或无母源抗体时,应及时采取抗血清或卵黄抗体注射,使雏鹅得到保护。对来源于小鹅瘟免疫不明确的雏鹅,更应进行抗体监测。 4.3.2在本病流行地区,利用弱毒苗,甚至强毒苗或油佐剂灭活苗免疫母鹅是预防本病最经济而有效的方法。用活毒苗作基础免疫,再以油佐剂灭活苗加强免疫,可以使种鹅产生高水平而持久的抗体,提高母源抗体水平。未发病的受威胁区不要用强毒苗免疫,以免散毒。对缺乏母源抗体的雏鹅,出壳后24小时内用小鹅瘟弱毒疫苗皮下注射或滴鼻,5天后即产生免疫力。在本病流行的情况下除应做好隔离封锁外,对出壳雏鹅可用抗小鹅瘟血清进行紧急防治,每只皮下注射0.5ml,能制止80%~90%已被感染的雏鹅发病,对发病雏鹅每只皮下注射1ml,同时配合抗菌消炎药物防止继发感染。 5 治 疗 5.1 本病目前尚五十分有效的治疗方法,在本病流行区域或已被本病污染的孵坊,可用高免血清或卵黄抗体皮下注射,可控制与预防本病的发生和流行。高免血清或卵黄抗体的琼扩效价应在1∶8以上,出现症状的注射2~3ml,未出现症状的注射0.3ml,保护率可达80%~90%,治愈率可达50%。 5.2 在用血清或卵黄抗体治疗的同时,可按每千克饮水中加入4g“华西”电解多维,4g炎炎通泰,混匀后让病鹅自由饮用,可提高治愈率,减少应激与继发感染。 5.3 中草药对本病具有一定的治疗作用,何日远(1990)、卢文贵(1990)等均报道了中草药防治小鹅瘟,报道了赤桂五瘟散防治小鹅瘟的有效性.赖国英等(1998)指出中药防治畜禽疾病的机理之一在于调节和调动畜禽体内的抗病力,防治效果随病鹅日龄的增加而提高。同时他们以实验证明了配方的可行性。 5.4 杨华(2000)用猪白细胞干扰素治疗小鹅瘟并进行了效果观察。皮下注射投药组在第2次给药后精神明显好转,腹泻停止,鹅群陆续恢复食欲。第3次给药后,全群恢复正常。该组在治疗的头12小时内死亡23只,全组治愈率为95.40%。他认为,猪白细胞干扰素进入自然感染病毒的患鹅后,能刺激机体产生抗病毒球蛋白,并能抑制病毒繁殖。可作为一种非特异性的广谱抗病毒药物。 6 结束语 小鹅瘟对养鹅业的发展构成严重威胁,防治小鹅瘟必须在采取综合的生物安全措施的基础上,认真做好种鹅的免疫注射和小鹅的正常免疫。此外,还需加强饲养管理。
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